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下面純潔科技小編與大家分享關于實驗室用水知識,其中包括,水的基本性質(zhì)、雜質(zhì)、實現(xiàn)室純水分極標準、水的純度的表示方法、應用。
1.水的基本性質(zhì)
1個水分子(H2O)是由1個氧原子和2個氫原子彎曲鍵結而成。由于正、負電荷的中心不一致,因此屬于極性分子。當2個水分子同時存在時,二者會由靜電交互作用與氫鍵結合,互相吸引并保持一定的距離。而1個水分子可以同時與4個水分子結合,形成晶體般的整齊結構。
水分子聚合體中,由于氫鍵鍵結的網(wǎng)狀結構會部分斷裂,而形成逐次移動變化的狀態(tài),因此,水在整體上呈現(xiàn)液態(tài),而此結構變化每秒可達1012次。
一般而言,水若含有適量的鈉、鉀離子及硅酸鹽等礦物質(zhì),就會覺得好喝,若含有大量殘留的鹽類,如鎂、鈣等非酸堿中性鹽類,就會覺得難喝。也就是說,所謂的水除了H2O外,還含有許多其它的成分,而這些成分的種類和含量決定了水的味道。
水極易溶解鹽類,即使陰陽離子經(jīng)由靜電的交互作用,很強的結合在一起,在水中也很容易電解。這是因為,水分子可以和離子結合產(chǎn)生“水合離子”。離子的半徑很小,電荷大的離子會與水分子強力的交互作用,由水分子在離子的周圍緊密排列。這時候,陽離子會與帶負極矩的氧原子相互作用,而陰離子則形成相反的結構。
2.水中存在的雜質(zhì)
源水雜質(zhì)(共5類):
A.電解質(zhì):
水中的電解質(zhì)包括:可溶性無機物,有機物,以及帶電的膠體粒子。影響水的電導率。通常水的雜質(zhì)越多,水的電導率就會高。我們知道,雜質(zhì)多的水,對我們的化學分析會產(chǎn)生很不利的影響。電解質(zhì)中尤以陰陽離子為主。一般可以通過用離子色譜法或原子吸收光譜法對其進行含量測定。也可聯(lián)用質(zhì)譜法分析,對其中的位未知組分初步鑒定。
B.有機物:
水中所含的有機物通常指有機酸和有機金屬化合物,測定方法通常為測定其化學耗氧量。
C.顆粒物質(zhì):
泥沙、塵埃、有機物、微生物等,可以用專門的顆粒測定器測定。
D.微生物:
細菌,浮游生物,藻類等。
E.溶解氣體:
N2、O2、Cl2、CO、CO2等,可以用氣相色譜法測定其含量。
3.實驗用純水標準
所謂實驗,是指對現(xiàn)象所推測的假設加以驗證的動作。假設能否被證明為真理,與假設能否具有再現(xiàn)性的結果至關重要。實驗的再現(xiàn)性除了要有良好的技巧,還受到所用化學試劑的純度和分析儀器的精密度的影響。實驗中用來配置溶液的化學試劑,及所使用的水的純度也非常重要。假設水中污染物對實驗檢測會造成影響,就必須去除這些物質(zhì)。此外,為了取得良好的再現(xiàn)性結果,使用能保持穩(wěn)定水質(zhì)的純水是必要的。
隨著實驗用的分析系統(tǒng)靈敏度的提高,對水的純度有了更高的要求。
1ppm=1mg/L;
1ppb=1μg/L;
1ppt=1ng/L=1μg/mL;
4.水的純度的表示方法
在水中,將距離1cm的兩片表面積為1cm2大小的電極加以通電,來監(jiān)測兩極間的導電率,通過所加電壓和測得的電流能夠獲知兩極間的電阻值,這個數(shù)值在水質(zhì)分析中通常被稱為電阻率或比電阻,其單位用MΩ.cm(mega ohm-centimeter)來表示。
電阻率的倒數(shù)稱為導電率或電導率,用μs/cm(micro Siemens per centimeter)來表示。
這兩個參數(shù)是表示水的純度的最常用參數(shù)。
將自來水中的離子去除,會使得電阻率值升高(導電率降低),但并非無限制的增加,這是因為部分水分子會電離為氫離子和氫氧根離子,其電阻率值極限值18.248MΩ.cm(25℃)。此外,電阻率值會隨著水的電離常數(shù)而改變,因而會受到水溫的影響。例如:25℃的超純水,其電阻值為18.2MΩ.cm,但在0℃則為84.2MΩ.cm,100℃則為1.3MΩ.cm。在25℃附近,當溫度上升1℃,其電阻值將下降0.84MΩ.cm。因此,多使用補償至25℃的電阻率值來做衡量標準。
此外,像總有機碳含量(TOC),熱源內(nèi)毒素含量,細菌含量,顆粒含量,微生物含量,總?cè)芙夤腆w含量(TDS)等也常常被用作補充說明水質(zhì)的重要參數(shù)。因此,水的純度標準通常由以上這些參數(shù)的一項或幾項來綜合說明、分級。
5.純水的分級標準
實驗室純水可分為4個常規(guī)等級:純水、去離子水、實驗室Ⅱ級純水和超純水
純水:純化水平最低,通常電導率在1~50μs/cm之間。它可經(jīng)由單一弱堿性陰離子交換樹脂、反滲透或單次蒸餾制成。典型的應用包括玻璃器皿的清洗、高壓滅菌器、恒溫恒濕實驗箱和清洗機用水。
去離子水:電導率通常在1.0~0.1μs/cm之間。通過采用含強陰離子交換樹脂的混床離子交換制成,但它有相對較高的有機物和細菌污染水平,能滿足多種需求,如清洗、制備分析標準樣、制備試劑和稀釋樣品等。
實驗室Ⅱ級純水:電導率<1.0μs/cm,總有機碳(TOC)含量小于50ppb以及細菌含量低于1CFU/mL。其水質(zhì)可適用于多種需求,從試劑制備和溶液稀釋,到為細胞培養(yǎng)配備營養(yǎng)液和微生物研究。這種純水可雙蒸而成,或整合RO和離子交換/EDI多種技術制成,也可以再結合吸附介質(zhì)和UV燈。
超純水:這種級別的純水在電阻率、有機物含量、顆粒和細菌含量方面接近理論上的純度極限,通過離子交換、RO膜或蒸餾手段預純化,再經(jīng)過核子級離子交換精純化得到超純水。通常超純水的電阻率可達18.2MΩ-cm,TOC<10ppb,濾除0.1μm甚至更小的顆粒,細菌含量低于1CFU/mL。超純水適合多種精密分析實驗的需求,如高效液相色譜(HPLC),離子色譜(IC)和離子捕獲-質(zhì)譜(ICP-MS)。少熱源超純水適用于像真核細胞培養(yǎng)等生物應用,超濾技術通常用于去除大分子生物活性物質(zhì),如熱源(結果為<0.005IU/mL)以及無法檢測到的核酸酶和蛋白酶。
目前世界上比較通用的純水標準主要有以下幾個:
國際標準化組織(ISO),美國臨床病理學會(CAP)試藥級用水標準,美國測試和材料實驗社團組織(ASTM),臨床試驗標準國際委員會(NCCLS),美國藥學會(USP)等。同時,我國也有相應的純水標準:中國國家電子級超純水規(guī)格GB/T11446-1997和中國國家實驗室用水規(guī)格GB6682-92等。因此市面上絕大多數(shù)的純水系統(tǒng),無論是進口的還是國產(chǎn)的,都是依據(jù)這些標準來設計流程的。
6.純水的應用
目前:純水主要應用在兩大領域:
一.生命科學應用領域
細菌細胞培養(yǎng),臨床生物化學,電泳,電生理學,酶聯(lián)免疫吸附分析,內(nèi)毒素分析,組織學,水栽培,細胞免疫化學,哺乳動物細胞培養(yǎng),介質(zhì)制備,微生物分析,分子生物學,單克隆抗體研究,植物組織培養(yǎng),放射性免疫分析等等。
二.分析和常規(guī)應用領域
蒸餾水器供水,蒸汽發(fā)生器,玻璃器皿清洗,樣本稀釋和試劑制備,超純水系統(tǒng)供水,固相萃取,普通化學,電化學,分光光度計,TOC分析,水質(zhì)分析,離子色譜,火焰法原子吸收(Flame-AAS),石墨爐原子吸收(GF-AAS),高效液相色譜(HPLC),液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS),電耦合等離子光譜儀(ICP-AES),等離子質(zhì)譜(ICP-MS),痕量金屬檢測,氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)等等。
對水的純度要求極高的幾個主要應用:
電泳:電泳用水最重要的要求是生物活性物質(zhì)諸如內(nèi)毒素(通常小于0.05EU/mL),核糖核酸酶和蛋白酶(不可測定)的去除。最好用電阻率18.2 MΩ-cm,TOC<10ppb,0.1μm或更小孔徑的微濾以及細菌含量低于1CFU/mL的超純水作為供水。
內(nèi)毒素分析:從分離到細胞培養(yǎng)的各種應用領域用水都要求規(guī)定內(nèi)毒素指標,內(nèi)毒素最大指標范圍從0.25IU/mL到0.03IU/mL。對內(nèi)毒素分析,適用少內(nèi)毒素的超純水,通常是0.05IU/mL或更小。超濾是制造少內(nèi)毒素超純水的必須手段(國際上通常使用MWCO為5000道爾頓的超濾膜),而且,可以結合UV等進行光氧化。
石磨爐原子吸收光譜:GF-AAS與其他原子吸收光譜測定的不同之處是,其火焰爐被電子發(fā)熱石墨管或棒替代,能在元素分析中達到很高的靈敏度。GF-AAS要求頂級純水系統(tǒng),提供ppt級的雜質(zhì)水平,18.2 MΩ-cm的電阻率和低TOC水平。內(nèi)置監(jiān)測儀提供純度保證,最終的水質(zhì)指標是由良好的預處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實現(xiàn)。
電感耦合等離子光譜儀:在ICP-AES應用中,對不同元素的靈敏度明顯不同,但金屬、過渡金屬、磷和硫檢測下限都在ppb范圍內(nèi)。ICP-AES對水的純度要求相當嚴格,電阻率大于18 MΩ-cm的超純水是必須的,TOC的要求一般不太重要,前處理要求反滲透或離子交換。
等離子質(zhì)譜:ICP-MS可被用于測定在ppt水平的元素。對這種靈敏的ICP-MS分析工作,水的純度要求非常嚴格,要求水中雜質(zhì)在ppt水平,電阻率18.2MΩ-cm和較低的TOC。最終的水質(zhì)指標是由良好的預處理系統(tǒng),加上連續(xù)循環(huán)流路和純水的超純化而實現(xiàn)。
質(zhì)譜分析:質(zhì)譜能對混合物進行痕量分析,由于其高靈敏度,要求最高純度的用水。所有的樣本制備和前處理,例如,固相萃取都需要超純水。要求水中雜質(zhì)在ppt水平,進行有機物分析時要求電阻率18.2 MΩ-cm,非常低的TOC,一般指標小于3ppb。
痕量金屬檢測:先進的現(xiàn)代分析儀器不斷提升分析的靈敏度。痕量元素現(xiàn)在通過使用諸如ICP-MS技術,可測定在ppt和亞ppt水平的物質(zhì)。痕量分析工作需要不含可測定成分的純水,并且水質(zhì)要求適用于最嚴格最靈敏的ICP-MS工作。因此,空白試劑,標準樣稀釋和樣本制備均需要純度最高的超純水,甚至需要在無塵室中操作。
隨著科技的發(fā)展,越來越多的應用開始要求使用純度高的超純水。
7.超純水保持最佳水質(zhì)的方法
超純水取水后很容易遭到環(huán)境污染,所以使用前取水(即取即用)方式時最合適的。只有把超純水與環(huán)境接觸的時間縮到極短,才能夠獲得純度極高的超純水。
在配置高純度的化學試劑時,盡量不要使用長時間儲桶中存放的超純水,因為儲桶經(jīng)長時間使用后,會因雜質(zhì)、微生物的污染而造成水質(zhì)的劣化,像這種水,在使用時已經(jīng)不再是超純水。
純水儲桶最好安裝空氣過濾器,防止環(huán)境因素造成的污染。
儲水桶請勿放置在日光直射處,水溫上升,容易造成微生物繁殖。特別是半透明儲水桶,也會因為日光通透而造成藻類繁殖。
超純水取水時一定要將初期的出水放掉,以獲得穩(wěn)定的水質(zhì)。
取水時讓超純水順著容器側(cè)壁流入,盡量不要讓氣泡產(chǎn)生,可降低空氣污染。
請不要在終端濾器后再連接軟管,使用直接取水的方式才能獲得純度高的超純水。
長時間不用純水時,應將壓力儲水桶中的RO水全部放掉以防止污染。
超純水機若長時間不使用,再次使用時應把初期純水充分放掉以確保水質(zhì)。
原則上,純水機應至少每7~10天通水一次,以防止微生物污染。
超純水使用要點:
1.即取即用;
2.排掉前端初期水;
3.取水時避免產(chǎn)生氣泡。